學位論文
Permanent URI for this collectionhttp://rportal.lib.ntnu.edu.tw/handle/20.500.12235/118617
Browse
14 results
Search Results
Item 草藥配方對小鼠急性酒精性肝損傷的保護作用(2023) 楊宥寧; Yang, Yu-Ning本論文利用具有解酒以及護肝功能的漢方食材葛花以及枳椇子搭配辣木籽粉組合成草藥配方GLJ，探討GLJ對於肝臟細胞發炎與小鼠急性酒精性肝損傷的保護作用。我們採用實驗小鼠作為動物實驗模式，分成空白處理組(Sham)、只有給予草藥配方GLJ處理組(GLJ)、只有給予急性酒精處理組(ALC)、以及餵食草藥配方GLJ後再給予急性酒精處理組(GLJ+ALC)。利用小鼠平衡桿行走、滾輪跑步、懸吊測試，以及抽血檢測血液中天門冬胺基酸胺基轉移酶(GOT)、丙胺基酸胺基轉移酶(GTP)、以及乳酸脫氫酶(LDH)生化值。此外檢視小鼠肝臟組織，來探討草藥配方GLJ對於急性酒精處理小鼠的行為異常與肝功能保護作用。實驗結果顯示：ALC組小鼠相較於Sham與GLJ組小鼠的運動以及平衡的表現明顯差；而GLJ+ALC組小鼠相較於ALC組小鼠的運動以及平衡的表現則顯著改善許多。此外，ALC組小鼠相較於Sham與GLJ組小鼠血液內GOT、GTP、LDH的數值明顯較高，並且具有急性酒精性肝損傷的情形；而GLJ+ALC組小鼠相較於ALC組小鼠血液內GOT、GTP、LDH的數值則顯著降低，而急性酒精性肝損傷的情形也顯著改善。綜合上述結果，我們認為草藥配方GLJ處理對於急性酒精處理的肝細胞發炎以及小鼠的肝損傷應該具有保護的作用。由於葛花、枳椇子、辣木籽均屬藥食同源的草藥食材，因此，應該可以作為預防急性酒精肝損傷的營養補充品。Item 脂肪酶催化果醣脂肪酸酯的合成及應用(2022) 陳詩云; Chen, Shih-Yun脂肪酸糖酯是無毒、無味、無刺激性的界面活性劑。它們可以由再生資源生產，並且可以完全被生物降解。脂肪酸糖酯的應用已擴展到許多領域，包括製藥、化妝品、洗滌劑和食品工業。果糖是一種存在許多植物中的單糖酮醣，它通常與葡萄糖結合形成雙醣蔗糖。過去，本實驗室發現果糖具有抗內毒素和抗氧化的功能，這開啟了對果糖新的潛在功效和應用的研究。為了增加對內毒素的親和力，應增加果糖的疏水性。在本研究中，我們利用市售的固定化脂肪酶Novozymes 435催化脂肪酸酯和果糖之間的轉酯化反應，從而生成果糖酯。藉由MPLC和HPLC分析可獲得果糖轉化產率(69.2%)和各個果糖酯的產率(單丙酸果糖酯-1，即FMP1為23.4%、單丙酸果糖酯-2，即FMP2為21.6%、雙丙酸果糖酯，即FDP為29.6%、單月桂酸果糖酯，即FML2為24.2%)。這些果糖酯吸附內毒素和清除自由基的能力也已經透過生化分析進行。除此之外，在活體試驗中，我們也利用內毒素誘導Wistar雌性大鼠導致敗血症之模型，觀察果糖酯是否能保護模式老鼠，減輕因內毒素而引起的症狀，包括對組織血流量變化與損傷影響，此外也利用西方墨點法（western blotting）去進一步的觀察內毒素增加PARP、4HNE及caspase 3等細胞凋亡相關蛋白的變化。而果糖酯可以降低細胞凋亡蛋白的表現，證明果糖酯的保護效應。因此，本研究建立了果糖酯的酶合成法以用於工業應用，開發果糖酯的新型生化活性以用於醫藥、醫療器材和保健食品工業。Item 傳統中藥樟芝萃取物對棕櫚酸處理血管內皮細胞脂質累積的緩解作用(2023) 陳韋羽; Chen, Wei-Yu高脂血症是動脈粥樣硬化最主要的危險因素，過程涉及動脈粥樣硬化患者在早期時脂質於動脈內膜中的累積，而形成動脈粥樣硬化的過程中，血管內皮細胞、巨噬細胞的氧化壓力、細胞凋亡、CD36以及Kruppel-like factor 4(KLF4)蛋白質的表現均扮演重要角色。本研究嘗試探討牛樟芝萃取物對於動脈粥樣硬化的調節潛力，使用棕櫚酸(Palmitic acid)處理血管內皮細胞SVEC4-10與RAW264.7巨噬細胞作為高脂累積細胞模式，藉由胞外實驗(in vitro)評估牛樟芝萃取物對於高脂累積的緩解作用。本研究採用由牛樟芝萃取出的化合物，利用HPLC確定牛樟芝萃取物的化學指標活性成份，並用DPPH測定牛樟芝萃取物的自由基清除能力，再以油紅O染色法(Oil Red O Stain)檢視牛樟芝萃取物可否有效降低高脂累積內皮細胞SVEC4-10的油滴脂質累積，以酵素結合免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) 檢測牛樟芝萃取物可否有效降低炎性細胞因子TNF-α (tumor necrosis factor-α)、IL-1β(interleukin-1β)的表現量；利用細胞免疫螢光染色方法檢測牛樟芝萃取物是否有效降低CD36蛋白質表現以及增強KLF4蛋白質表現；利用遷移試驗(transwell migration assay)檢測牛樟芝萃取物是否增加RAW264.7巨噬細胞的移動能力來清除血管內皮細胞的脂質累積。本實驗結果顯示：此牛樟芝萃取物具備很好的自由基清除能力，可以顯著降低血管內皮細胞的油滴脂質累積，減少TNF-α、IL-1β以及CD36的表現量，但是增強KLF4蛋白質表現。此外，牛樟芝萃取物可以促進RAW264.7巨噬細胞的遷移能力。綜合上述結果，我們認為牛樟芝萃取物可以透過減少血管內皮細胞的油脂累積，抑制巨噬細胞的氧化壓力與細胞凋亡，來達到緩解高脂累積，以及調節動脈粥樣硬化的潛力。Item 龜鹿二仙膠抗氧化能力與對關節細胞活性的影響(2023) 吳炫梅; Wu, Hsuan-Mei龜鹿二仙膠是由龜板和鹿角等重要藥材，再加上枸杞、人參等多種天然成分熬製而成的中藥製劑。它的功效在於強化骨骼和減緩關節退化的症狀，常被民間視為補筋骨的良方。然而，龜鹿二仙膠在市場上的價格差異極大，品質也參差不齊，時常發生以假亂真的情況。為此，我們希望針對龜鹿二仙膠成分中的龜板和鹿角建立中藥指紋圖譜，並且檢視龜板與鹿角溶離胜肽的抗氧化能力以及對於關節滑膜細胞(synoviocyte, HIG-82)的活性，希望藉此確立龜鹿二仙膠的成分品質，並且從龜鹿二仙膠篩選出有效緩解關節退化的成分，提供科學中藥廠家研製成有效緩解關節退化的健康食品或是藥物。我們首先與科學中藥廠家合作，建立傳統中藥龜鹿二仙膠的中藥成分指紋圖譜；然後選取科學中藥廠家提供的龜板與鹿角溶離胜肽成分，利用DPPH抗自由基實驗檢視龜板與鹿角以及溶離後胜肽成分的抗氧化能力；以及採用關節滑膜細胞，利用MTT細胞存活試驗檢視龜板與鹿角溶離胜肽對關節滑膜細胞的生長存活率，藉此篩選出有效緩解關節退化的溶離胜肽成分。本實驗結果顯示：從龜板與鹿角的13種溶離胜肽成分中，發現從鹿角萃取的7種溶離胜肽成分的抗氧化能力較佳，對於關節滑膜細胞的細胞生長存活情形也最佳，至於其他從龜板萃取的6種溶離胜肽成分的抗氧化能力則較差，對於關節滑膜細胞的細胞生長存活情形也較鹿角萃取的7種溶離胜肽來得差。從胺基酸序列的分析發現抗氧化能力佳以及對於關節滑膜細胞的細胞生長有利的溶離胜肽成分，均含有丙胺酸(Alanine，Ala)-絲胺酸(Serine，Ser)-半胱胺酸(Cysteine，Cys)的序列片段。換句話說，從鹿角溶離胜肽對於抗氧化能力以及關節滑膜細胞的細胞生長，都比龜板溶離胜肽來得效果佳。因此，本論文推論從鹿角溶離胜肽應該比較有機會研製成有效緩解關節退化的健康食品或是藥物。Item 龜鹿二仙膠應用在緩解關節與骨骼退化的補充替代醫療潛力(2021) 林涵君; Lin, Han-Chun隨著超高齡社會的來臨，高齡長者行動不便以及長期臥病在床等問題，已經造成醫療資源與健保費用的龐大支出，為緩解長者骨質疏鬆症和退化性關節炎，民間常以龜鹿二仙膠補強筋骨。本論文主要研究龜鹿二仙膠對於緩解關節與骨骼退化的替代醫療效果，本研究選用與順天堂科學中藥廠提供的龜鹿二仙膠，龜鹿二仙膠主要藥材包括枸杞、龜板、人參和鹿角。本研究首先利用1,1-二苯基-2-吡啶並肼基（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl；DPPH）自由基清除能力測試檢視龜鹿二仙膠的抗氧化力；再利用脂多醣（lipopolysaccharide，LPS）處理關節滑膜細胞（HIG-82），藉此誘發關節滑膜細胞（synoviocyte，HIG-82）的發炎現象，透過細胞存活率分析法（3-（4,5-Dimethylthiazol-2-yl）-2,5- diphenyltetrazolium bromide；MTT assay）以及酵素結合免疫吸附分析法（Enzyme-linked immunosorbent；ELISA assay），檢視龜鹿二仙膠是否可以緩解脂多醣（LPS）誘發關節滑膜細胞（HIG-82）的發炎；此外，本研究利用化療藥物阿黴素預先處理，藉此誘發老化小鼠的骨骼疏鬆，然後使用骨骼電腦斷層掃描技術檢視脛骨的骨小樑與骨密度，藉此評估龜鹿二仙膠是否可以緩解化療藥物阿黴素所誘發小鼠的骨質疏鬆。本論文結果顯示龜鹿二仙膠不但可以顯著增強DPPH自由基清除能力，對於脂多醣（LPS）誘發關節滑膜細胞（HIG-82）的發炎，也有顯著的緩解效果；此外，對於化療藥物阿黴素（doxorubicin，DOX）所誘發小鼠的骨質疏鬆，連續餵食龜鹿二仙膠四週後，也有顯著的緩解效果。歸納本研究結果，可以說明龜鹿二仙膠對於緩解關節與骨骼退化確實具有替代醫療效果。研究者認為適時給予中、高齡長者補充龜鹿二仙膠，將有助於緩解高齡長者行動不便以及長期臥病在床等問題，大大降低醫療資源與健保經費的龐大支出。Item 應用果蠅模式篩選中草藥抑肝散(順寧意)緩解阿茲海默氏症的醫療潛力(2021) 鄭詠馨; Jheng, Yong-Sin傳統中藥抑肝散過去常用於治療神經退行性疾病、精神官能症、失眠。而阿茲海默氏症是失智症裡各類型中最常見的，主要是以澱粉樣蛋白β (Aβ) 的異常堆積和Tau蛋白的過度磷酸化造成腦部細胞損傷有關。本文利用DPPH檢測中藥抑肝散的自由基清除與抗氧化能力；再透過細胞存活率分析法(MTT assay)檢視中藥抑肝散對於SH-SY5Y神經細胞的保護作用，實驗結果顯示中藥抑肝散具有相當高的自由基清除與抗氧化能力，對於SH-SY5Y神經細胞也有顯著的保護作用。本文利用轉基因果蠅表現Aβ42和hTauR406W毒性蛋白質作為AD動物模式，研究中藥抑肝散對人類Aβ 和人類Tau蛋白過度累積所引發的神經毒性在果蠅上是否具有保護作用。由於人類Aβ蛋白過度表現的Aβ42 會產生複眼退化；因此利用綠螢光蛋白觀察Aβ42 表現所造成的複眼退化，以及計算hTauR406W的背甲剛毛數目，可以評估中藥抑肝散對於Aβ和Tau蛋白過度表現果蠅的神經保護作用，實驗結果顯示中藥抑肝散可以緩解Aβ42 複眼的退化；另外也可以顯著緩解hTauR406W果蠅的背甲剛毛退化。此外，透過高靈敏的免疫磁減量(ImmunoMagnetic Reduction，IMR)技術可以評估Aβ42的Aβ蛋白表現，以及評估hTauR406W的Tau蛋白表現，結果顯示中藥抑肝散可以降低Aβ蛋白以及Tau蛋白的表現。歸納研究結果，可以說明中藥抑肝散對於緩解阿茲海默氏症可能具有替代醫療效果。Item 海洋深層水通過IGF1R的表現強化間葉幹細胞的能力以調節microRNA-880-3p治療老化所造成的心臟疾病(2021) 武柏寬; Wu, Po-Kuan衰老是降低心臟功能的原因之一，幹細胞療法可能為治療由衰老引起的心臟功能障礙提供更光明的未來。海洋深層水（DSW）顯示出對細胞保護的有益作用，但細胞機制仍不清楚。這項研究旨在研究用海洋深層水（DSW）預處理的間葉幹細胞是否比未經海洋深層水（DSW）預處理的間葉幹細胞具有更好的心臟保護作用。在細胞研究中，我們發現深海水通過膜蛋白胰島素樣生長因子1受體（IGF1R）的表達提高幹細胞活力。此外，我們證實miR-880-3p在老年心肌細胞中表現量增加。在與幹細胞共培養的老年心肌細胞中，我們發現海洋深層水（DSW）預處理的幹細胞顯著降低了老年心肌細胞中衰老的miR-880-3p的表現，從而導致了心肌細胞功能的恢復。在動物研究中，在治療老年的大鼠心臟中，我們發現海洋深層水（DSW）預處理的幹細胞顯著降低了老年心臟中老化的蛋白表現與纖維化表現，從而導致了心臟功能的恢復。此外，我們也證實海洋深層水（DSW）預處理的幹細胞能夠修復心臟中細胞雜亂的排列與細胞數量。Item 養肝丸(神立清)之抗氧化及肝臟保護藥效評估(2021) 葉佳文; Yeh, Chia-Wen中文摘要 在臺灣，民眾罹患肝病盛行率居高不下，而肝病造成之死亡率，多年來亦高居十大死因之前幾位，因此開發有效保護肝臟功能的藥物，一直是生技醫藥產業積極投注資金及研發的重點項目。過去西方醫學對於肝病的治療多採取支持性的保守療法，對於具體促進肝功能的西藥開發進程更是緩慢。從中醫學古籍中草藥相關之記載中，對於保護肝臟的中藥方已有相當清楚的認識，惟肝病中醫藥雖然源遠流長數千年，但由於西方科學盛起之故，未經科學研究證實功效的中醫藥反而屢受質疑。為此，本論文主要研發具保護肝臟功能的傳統中藥，以科學實驗的研究證實相關藥物功效。本研究選用順天堂中藥養肝丸(神立清)顆粒劑探討其抗氧化及肝臟保護的藥效。利用清除DPPH自由基能力測定實驗，本實驗研究結果發現養肝丸(神立清)顆粒劑具備顯著的清除DPPH自由基能力；利用活體外細胞實驗，結果發現養肝丸(神立清)顆粒劑可以緩解因革蘭陰性菌外膜成分脂多糖(LPS)誘發肝臟細胞的損傷。此外，利用動物餵食實驗，結果發現養肝丸(神立清)顆粒劑可以保護小鼠對乙醯胺酚（APAP）誘發的肝毒性。綜觀順天堂中藥養肝丸(神立清)顆粒劑，效能確實並具有抗氧化的功效，再者目前經由科學學理實驗研究證實養肝丸(神立清)顆粒劑確實具有保護肝臟機能功效，因此應該可以作為保肝的中藥。Item 環境感測換氣系統對於緩解豬隻感染呼吸道疾病的應用潛力評估(2021) 陳孟可; Chen, Meng-Ke臺灣養豬業中肉豬生長遲滯情況，經常發生在保育期與肥育前期肉豬體內的疾病包括呼吸道跟消化道的感染，造成養豬業者嚴重的經濟損失。如何有效預防及感測監控保育期與肥育前期豬隻的呼吸道傳染疾病，已經是臺灣養豬業者亟需要解決的關鍵問題。為此，本論文探討的目的針對環境感測換氣系統對於緩解豬隻呼吸道疾病的影響，希望藉此輔助豬隻的呼吸道傳染病防治，提升飼養的生產力及品質。 本論文從畜牧環境內部空氣品質感測的觀點切入，開發適用於畜牧養殖場內的環境感測系統，透過有策略的建構環境感測器與收集感測資料，進行資料蒐集分析，並運用偵測到環境的不同特徵值資料，作為應用防範豬隻流感與相關傳染病參考。 研究實驗結果顯示，室內豬場空氣中影響的潛在因子包括：二氧化碳(CO2)濃度、濕度、環境細懸浮微粒(PM2.5)及環境總揮發性有機化合物(TVOC)都較室外的空氣濃度高；而豬場環境排風扇的運作增加室內的通風性，會使得空氣品質獲得明顯改善；此外，仔豬血液的檢測報告也證實飼養在設置排風扇豬場的仔豬，體內引起過敏反應的嗜酸性白血球細胞數目，會遠較密閉豬場內的仔豬低。 這結果說明了，建置環境空氣質量監測系統及排風扇，除了可改善及緩解目前動物呼吸道的疾病外，未來也可提供有效的環境監測及產業應用的價值。Item 利用幹細胞分泌體調節粒線體動態失衡所造成的巨噬細胞極化藉以改善痛風(2021) 郭承樺; Kuo, Cheng-Hua痛風性關節炎是由單鈉尿酸鹽結晶(monosodium urate crystals, MSU)的堆積所造成的，而巨噬細胞在急性痛風性關節炎中扮演很重要的角色。活化的巨噬細胞通常被分成兩大類：典型活化巨噬細胞(classically activated macrophages, M1)與另類活化巨噬細胞(alternatively activated macrophages, M2)，而他們分別具有促發炎與抗發炎的功效。粒線體動態被視為維持正常細胞功能的一個機制，在先前的研究中，幹細胞能旁分泌(paracrine)出生長因子等進而影響周圍的細胞。將這些幹細胞旁分泌出來的分泌體(secretome)收集成條件培養基(conditioned medium)做後續實驗，而為了能使幹細胞條件培養基(stem cell conditioned medium, SCM)能更加有效，會將幹細胞預先培養在含有發炎因子的環境中數小時，使其提早適應病理環境藉以強化他，並收集強化幹細胞條件培養基(strengthened stem cell conditioned medium, SSCM)。高尿酸血症所引起的痛風性關節炎由於發作時只能利用一些化學藥物來消炎止痛，而且這些藥物會導致胃腸道與腎臟的毒性，所以本研究想利用幹細胞的分泌體來進行治療。在細胞實驗中，我們利用不同濃度的MSU結晶刺激巨噬細胞，結果顯示巨噬細胞的ROS含量、發炎現象隨著結晶濃度的增加而隨之增加，粒線體動態則是隨著結晶濃度的增加而愈趨向融合(fusion)。在經過發炎環境的預處理後，幹細胞CXCR4的蛋白質表現量上升，證實能透過這條路徑強化幹細胞，且強化幹細胞conditioned medium能使發炎現象下降並改善粒線體動態的不平衡，也能夠使M1巨噬細胞的數量下降。在動物實驗中，強化幹細胞conditioned medium能夠使關節中細胞浸潤的現象降低，並能夠使軟骨組織的排列較為緊密且量多，而粒線體動態也有改善的現象。因此強化幹細胞conditioned medium對於痛風有改善的潛力。