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    龜鹿二仙膠應用在緩解關節與骨骼退化的補充替代醫療潛力
    (2021) 林涵君; Lin, Han-Chun
    隨著超高齡社會的來臨,高齡長者行動不便以及長期臥病在床等問題,已經造成醫療資源與健保費用的龐大支出,為緩解長者骨質疏鬆症和退化性關節炎,民間常以龜鹿二仙膠補強筋骨。本論文主要研究龜鹿二仙膠對於緩解關節與骨骼退化的替代醫療效果,本研究選用與順天堂科學中藥廠提供的龜鹿二仙膠,龜鹿二仙膠主要藥材包括枸杞、龜板、人參和鹿角。本研究首先利用1,1-二苯基-2-吡啶並肼基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl;DPPH)自由基清除能力測試檢視龜鹿二仙膠的抗氧化力;再利用脂多醣(lipopolysaccharide,LPS)處理關節滑膜細胞(HIG-82),藉此誘發關節滑膜細胞(synoviocyte,HIG-82)的發炎現象,透過細胞存活率分析法(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide;MTT assay)以及酵素結合免疫吸附分析法(Enzyme-linked immunosorbent;ELISA assay),檢視龜鹿二仙膠是否可以緩解脂多醣(LPS)誘發關節滑膜細胞(HIG-82)的發炎;此外,本研究利用化療藥物阿黴素預先處理,藉此誘發老化小鼠的骨骼疏鬆,然後使用骨骼電腦斷層掃描技術檢視脛骨的骨小樑與骨密度,藉此評估龜鹿二仙膠是否可以緩解化療藥物阿黴素所誘發小鼠的骨質疏鬆。本論文結果顯示龜鹿二仙膠不但可以顯著增強DPPH自由基清除能力,對於脂多醣(LPS)誘發關節滑膜細胞(HIG-82)的發炎,也有顯著的緩解效果;此外,對於化療藥物阿黴素(doxorubicin,DOX)所誘發小鼠的骨質疏鬆,連續餵食龜鹿二仙膠四週後,也有顯著的緩解效果。歸納本研究結果,可以說明龜鹿二仙膠對於緩解關節與骨骼退化確實具有替代醫療效果。研究者認為適時給予中、高齡長者補充龜鹿二仙膠,將有助於緩解高齡長者行動不便以及長期臥病在床等問題,大大降低醫療資源與健保經費的龐大支出。
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    龜鹿二仙膠抗氧化能力與對關節細胞活性的影響
    (2023) 吳炫梅; Wu, Hsuan-Mei
    龜鹿二仙膠是由龜板和鹿角等重要藥材,再加上枸杞、人參等多種天然成分熬製而成的中藥製劑。它的功效在於強化骨骼和減緩關節退化的症狀,常被民間視為補筋骨的良方。然而,龜鹿二仙膠在市場上的價格差異極大,品質也參差不齊,時常發生以假亂真的情況。為此,我們希望針對龜鹿二仙膠成分中的龜板和鹿角建立中藥指紋圖譜,並且檢視龜板與鹿角溶離胜肽的抗氧化能力以及對於關節滑膜細胞(synoviocyte, HIG-82)的活性,希望藉此確立龜鹿二仙膠的成分品質,並且從龜鹿二仙膠篩選出有效緩解關節退化的成分,提供科學中藥廠家研製成有效緩解關節退化的健康食品或是藥物。我們首先與科學中藥廠家合作,建立傳統中藥龜鹿二仙膠的中藥成分指紋圖譜;然後選取科學中藥廠家提供的龜板與鹿角溶離胜肽成分,利用DPPH抗自由基實驗檢視龜板與鹿角以及溶離後胜肽成分的抗氧化能力;以及採用關節滑膜細胞,利用MTT細胞存活試驗檢視龜板與鹿角溶離胜肽對關節滑膜細胞的生長存活率,藉此篩選出有效緩解關節退化的溶離胜肽成分。本實驗結果顯示:從龜板與鹿角的13種溶離胜肽成分中,發現從鹿角萃取的7種溶離胜肽成分的抗氧化能力較佳,對於關節滑膜細胞的細胞生長存活情形也最佳,至於其他從龜板萃取的6種溶離胜肽成分的抗氧化能力則較差,對於關節滑膜細胞的細胞生長存活情形也較鹿角萃取的7種溶離胜肽來得差。從胺基酸序列的分析發現抗氧化能力佳以及對於關節滑膜細胞的細胞生長有利的溶離胜肽成分,均含有丙胺酸(Alanine,Ala)-絲胺酸(Serine,Ser)-半胱胺酸(Cysteine,Cys)的序列片段。換句話說,從鹿角溶離胜肽對於抗氧化能力以及關節滑膜細胞的細胞生長,都比龜板溶離胜肽來得效果佳。因此,本論文推論從鹿角溶離胜肽應該比較有機會研製成有效緩解關節退化的健康食品或是藥物。