學位論文
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Item 熱加工食品添加胺基酸緩解庫氏細胞發炎反應之研究(2022) 林冠言; Lin, Kuan-Yen肝臟是人體最重要的器官之ㄧ，肝臟每天受到許多外源性及內源性的威脅，若長期處於發炎狀態，將會造成不可逆的功能受損，因此肝臟的健康與否對人體而言極為重要。丙烯醛是一種廣泛存在於人類生活中的有毒物質，空氣及某些食物中均含有丙烯醛，而在食品加工的過程中也會產生丙烯醛。丙烯醛一旦經人體攝入後，因為其親和能力強，容易與蛋白質、DNA、核酸等物質反應，使這些物質喪失其原先存在於人體中的能力；另一方面，丙烯醛對細胞的影響包括發炎、氧化壓力、內質網壓力…等。本研究探討梅納反應中間產物丙烯醛對肝臟庫氏細胞發炎之影響，以及以不同胺基酸與丙烯醛共同加熱，探討熱反應物是否可降低丙烯醛對於庫氏細胞的發炎反應。本研究首先以0、50、100、150、200μM濃度丙烯醛熱反應物對於庫氏細胞進行細胞毒性(MTT)測試。結果顯示50μM丙烯醛熱反應物對庫氏細胞大約有2成的致死率。其次，以甘胺酸、丙胺酸、擷胺酸、胱胺酸、麩胺醯胺、蘇胺酸以及麩胺酸與丙烯醛在高溫下迴流製備熱反應物，探討熱反應物對庫氏細胞發炎的效果。實驗結果發現，半胱胺酸與丙烯醛熱處理反應可以降低丙烯醛的殘留量並提高庫氏細胞的細胞存活率，且西方墨點法分析也發現，丙烯醛-半胱胺酸熱反應物可以降低丙烯醛熱反應物對庫氏細胞中發炎相關的IKKβ、Nf-κB、caspase-1及NLRP3等蛋白表現量。總結本研究證實半胱胺酸在迴流加熱下可以與丙烯醛產生反應，以降低丙烯醛對於庫氏細胞的發炎情形，此研究結果亦可以為後續研究丙烯醛於肝臟的發炎機制以及胺基酸於熱加工食品開發時的參考。Item α-硫辛酸延緩脂多醣誘導庫氏細胞NLRP3發炎小體活化及庫氏細胞培養液誘發小鼠FL83B肝臟細胞胰島素阻抗之研究(2020) 高紹庭; Kao, Shao-Ting第二型糖尿病的主要病因為胰島素阻抗，造成身體周邊組織無法讓血液中之葡萄糖順利進入細胞氧化產能。文獻指出，糖尿病的成因與身體的氧化壓力有高度相關性。硫辛酸(α-lipoic acid, ALA)具有抗氧化、協助身體產能代謝及協助體內抗氧化物質之還原再生等功能。本研究欲探討硫辛酸對於給予脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)誘導不朽型小鼠庫氏細胞株(Immortal Kupffer cells)抗發炎及其改善庫氏細胞條件培養液誘發小鼠肝臟FL83B上皮細胞株胰島素阻抗之效果與可能機轉。庫氏細胞株先給予不同濃度(5, 100, 500, 2000μM)之ALA處理6小時後，再同時給予LPS 1μg/mL刺激6小時及nigericin 13.4μM 或ATP 1μM處理2小時增強發炎因子訊號，分析庫氏細胞發炎相關蛋白質表現量，並收集條件培養液進行後續實驗；其次，以庫氏細胞株條件培養液培養FL83B細胞株，並分析FL83B細胞胰島素阻抗相關蛋白質表現量。結果顯示，ALA濃度2400μM時庫氏細胞仍具有100%以上之存活率。而以LPS誘導庫氏細胞發炎之條件培養液其IL-1β產量與未誘導者相較提升了21.3倍，但是庫氏細胞株先給予ALA 2000μM處理再以LPS誘導後其IL-1β之產量降低了105倍。利用JC-1觀察ALA對LPS誘導庫氏細胞粒線體膜電位保護之效果，結果顯示ALA可以抑制LPS造成庫氏細胞粒線體膜電位失衡，並降低ROS對細胞之傷害。Western blot分析發現，ALA可以有效降低LPS誘導之庫氏細胞NF-κB、NLRP3蛋白之表現；另一方面，ALA可以明顯提升LPS處理庫氏細胞條件培養液培養FL83B細胞株胰島素傳訊蛋白p-PI3K、p-AKT及GLUT2之表現量。以上結果顯示，ALA可以減輕LPS誘導之庫氏細胞NLRP3發炎體活化，以及LPS誘導庫氏細胞條件培養液培養時FL83B細胞之胰島素阻抗。